PCR实验室建设

PCR实验室建设的四要素。

1试剂准备区。

用于备考试剂。该区域为正压，目的是防止污染物溢出。该区域内部分为普通提取试剂的准备区域、PCR试剂的准备区域和PCR主反应液的准备区域。在普通提取试剂的准备区域内准备样品核酸提取时所需的分解液、提取液等PCR试剂准备区域用于PCR试剂的制备和保存。例如准备引物、探针等PCR试剂。为了防止交叉污染，避免反复冷冻和解冻，试剂贮藏溶液应平均为小作业体积，贮藏在该房间后，PCR主反应液准备区进行主反应混合液(样品除外)。将所有PCR所需试剂混合)添加到PCR管的操作中。重要提示:不得将其他房间的材料(包括扩张、模板和目标核酸或阳性对照、供应品或设备)带入试剂准备区。

2样品准备区。

该区域无压力设置要求。该区域用于分样，研磨、粉碎、均匀浆料。这些粉碎、研磨和均浆处理过程中可能会产生气溶胶，因此阳性样品可能会污染后续操作。该区与后区严格隔离，应放置在与后三区隔离的独立房间内。在样品准备区域内也可以设置专用的封闭区域和房间来接收和储藏样品。这个房间可以放冰箱储藏样品，应该和样品准备区的其他区域隔离。样品备用区的人员不得进入试剂备用区。

3核酸提取区。

核酸提取区是进行样品核酸提取的区域。该区域为负压，目的是防止核酸溢出造成污染。样品准备区域包括从样品中提取核酸和纯化的区域和将核酸添加到包括PCR主反应混合液管的操作区域。添加样品后，PCR管盖应尽快盖上。使用PCR板和盖板时，阳性对照和含有目标序列的样品应与待测样分开操作，以免模板添加时造成交叉污染。

重要提示:该房间的所有物品都不得带试剂准备区。

4扩大和产品检测区域。

该区域用于扩大PCR和分析PCR。PER仪放在这个区域。房间保持负压，目的是防止核酸溢出。在这个地区，人们必须一直穿工作服。

手套和离开房间前脱离，防止扩张子污染其他地方。所有用于扩张和产品检测的设备都应指定用于该房间。PCR分析]二作也设置在该区域，例如酶切割、序列、克隆等，但实验室必须尽量将这些活动分隔到不同的区域和不同的房间。降低扩大产品的污染风险。如果没有条件在该区域设置负压，该区域必须设置排风装置。

重要提示:该房间的物品不得带样品准备区或试剂准备区。